酚/氯仿抽提法提取绵羊凝血块中基因组DNA

• 作者: 曹果清 莫清珊 陈凤仙
• 来源期刊: 农业科学与技术（英文版）
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊凝血块 酚/氯仿抽提法 DNA提取
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 76-78
• 页数: 3页
• 分类号: S8
• 字数: 1510字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4229-B.2009.05.018

摘要

[目的]对组织DNA提取方法进行改进,建立一种从绵羊凝血块中提取基因组DNA的方法.[方法]将绵羊凝血块用眼科剪剪碎,用组织DNA抽提液裂解细胞,用蛋白酶K消化后,经过酚/氯仿抽提,无水乙醇沉淀获得基因组DNA.用NanoDrop ND-1000微型分光光度计检测DNA浓度和纯度.用0.8%琼脂糖凝胶电泳检验基因组DNA的完整性.以绵羊微卫星位点BM203为扩增位点,分别以F:5′-GGGTGTGACATTTTGTTCCC-3′,R:5′-CTGCTCGCCACTAGTCCTTC-3′为上下游引物,进行PCR扩增试验.PCR产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测.[结果]提取的DNA浓度为(159.90±0.70) ng/μl,A260/A280比值为1.80±0.01,分子完整,结果理想.以从凝血块中提取的DNA为模板,对绵羊BM203微卫星位点进行了PCR扩增,扩增产物条带整齐、明亮、特导性强,扩增效果好.[结论]该方法简单、实用,提取的DNA可满足后续相关研究对DNA质量的要求,值得推广借鉴.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹果清	山西农业大学动物科技学院	73	450	11.0	18.0
2	莫清珊		2	21	2.0	2.0
3	陈凤仙	山西农业大学动物科技学院	2	21	2.0	2.0