稳定表达rhPDGF-BB的CHO细胞系的建立及其生物学特性研究

• 作者: 于德民 宋丹 张绍敏 李兰英 毋中明 董荣娜
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 血小板源性生长因子 CHO细胞 基因 转染 皮肤溃疡 糖尿病并发症
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 124-127
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2009.02.014

摘要

目的:建立稳定表达人血小板衍化生长因子-BB(PDGF-BB)全长的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系,并检测表达产物的生物活性.方法:通过脂质体瞬间转染的方法将含有rhPDGF-BB全长的质粒转染CHO细胞系.利用抗生素筛选的方法使转染阳性的细胞扩增和单克隆化,进一步稳定传代.通过Western印迹法挑选高表达克隆,进而使用MTT法检测转染前后细胞增殖活性和转染细胞上清培养NIH 313细胞的增殖情况.反复传代、冻存和复苏鉴定表达的稳定性.结果:获得稳定且高效表达rhPDGF-BB的CHO细胞系;转染前后细胞生长速度存在差异,NIH 3T3细胞的增殖随转染细胞上清的浓度和培养时间的增加而增加.结论:pSELECT-GFPzeo-MCS载体能作为稳定表达的载体用于筛选.稳定表达rhPDGF-BB的CHO细胞具有新的生物学功能,实现了组织工程种子细胞的构建,为研究糖尿病溃疡创面愈合的生物材料提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于德民		16	66	5.0	7.0
2	张绍敏		2	3	1.0	1.0
3	毋中明		2	3	1.0	1.0
4	宋丹		2	3	1.0	1.0
5	李兰英		2	3	1.0	1.0
6	董荣娜		1	2	1.0	1.0