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摘要:
目的 构建VEGF-A的短发夹RNA真核表达载体,并通过其介导的RNA干扰抑制人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y VEGF-A的表达.方法 根据VEGF-A的cDNA序列合成两对寡核苷酸片段,退火后分别插入真核表达载体组成重组质粒psc001、psc002,对重组质粒进行PCR、测序鉴定验证并经Western Blot筛选,然后将筛选所得的质粒转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y.转染48h后行Annexin V和PI双重标记流式细胞仪检测转染细胞凋亡情况,ELISA检测VEGF-A蛋白的表达水平.结果 PCR和测序证实寡核苷酸片段已成功插入质粒psc001、psc002中,流式细胞仪检测结果 显示转染的外源基因未引起显著的神经母细胞瘤细胞凋亡,ELISA结果 显示转染后细胞株SH-SYSY的VEGF-A蛋白表达受到显著抑制(P<0.05).结论 成功构建人VEGF-A的短发卡RNA真核表达载体,转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞后能显著抑制VEGF-A的表达,但没有引起显著的细胞凋亡(P0.05).
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文献信息
篇名 RNA干扰对人神经母细胞瘤VEGF-A表达的抑制作用
来源期刊 中华小儿外科杂志 学科 医学
关键词 血管内皮细胞生长因子 RNA干扰 神经母细胞瘤 细胞凋亡
年,卷(期) 2009,(6) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 384-387
页数 4页 分类号 R73
字数 3452字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2009.06.012
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 吴晔明 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心外科 81 264 8.0 11.0
2 顾松 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心外科 24 72 4.0 7.0
3 张雁冰 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心外科 4 3 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
血管内皮细胞生长因子
RNA干扰
神经母细胞瘤
细胞凋亡
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华小儿外科杂志
月刊
0253-3006
42-1158/R
大16开
武汉市胜利街155号
38-19
1980
chi
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20
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