RNA干扰对人神经母细胞瘤VEGF-A表达的抑制作用

• 作者: 吴晔明 张雁冰 顾松
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子 RNA干扰 神经母细胞瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 384-387
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3452字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2009.06.012

摘要

目的 构建VEGF-A的短发夹RNA真核表达载体,并通过其介导的RNA干扰抑制人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y VEGF-A的表达.方法 根据VEGF-A的cDNA序列合成两对寡核苷酸片段,退火后分别插入真核表达载体组成重组质粒psc001、psc002,对重组质粒进行PCR、测序鉴定验证并经Western Blot筛选,然后将筛选所得的质粒转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y.转染48h后行Annexin V和PI双重标记流式细胞仪检测转染细胞凋亡情况,ELISA检测VEGF-A蛋白的表达水平.结果 PCR和测序证实寡核苷酸片段已成功插入质粒psc001、psc002中,流式细胞仪检测结果 显示转染的外源基因未引起显著的神经母细胞瘤细胞凋亡,ELISA结果 显示转染后细胞株SH-SYSY的VEGF-A蛋白表达受到显著抑制(P<0.05).结论 成功构建人VEGF-A的短发卡RNA真核表达载体,转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞后能显著抑制VEGF-A的表达,但没有引起显著的细胞凋亡(P0.05).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴晔明	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心外科	81	264	8.0	11.0
2	顾松	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心外科	24	72	4.0	7.0
3	张雁冰	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心外科	4	3	1.0	1.0