pEGFP-hTERT真核表达载体的构建及转染牛乳腺细胞方法的优化

• 作者: 兰志刚 张涌 潘春留 贺小英 闫晶
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛乳腺上皮细胞 胶原酶 表达载体 转染
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 14-19
• 页数: 6页
• 分类号: Q291|S813.3
• 字数: 4691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2009.05.004

摘要

针对牛乳腺细胞体外培养存活周期短、转染效率低等特点,分别采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶消化培养法及组织贴壁培养法,比较了牛乳腺细胞的生长、迁移、分化和凋亡等一系列特征.同时构建了携带绿色荧光蛋白报告基因的端粒酶融合表达载体pEGFP-hTERT,采用脂质体分别转染两种真核表达载体pEGFP-hTERT、pEGFP-C1,通过比较载体不同浓度、传代细胞转染适合密度及生长活力、转染后的荧光强度等检测转染效率.结果表明,第3代细胞接种密度大约70%,浓度为350 ng/μL的载体适合于牛乳腺细胞的转染,转染效率大约为25%.试验结果为牛乳腺细胞体外转基因研究奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张涌	西北农林科技大学动物医学院	105	815	13.0	25.0
2	贺小英	西北农林科技大学动物医学院	6	19	2.0	4.0
3	兰志刚	西北农林科技大学动物医学院	3	15	3.0	3.0
4	潘春留	西北农林科技大学动物医学院	5	48	3.0	5.0
5	闫晶	西北农林科技大学动物医学院	4	9	1.0	3.0