胚胎干细胞与四倍体互补产生转基因小鼠

• 作者: 关娜 单智焱 徐燕宁 申景岭 金连弘 雷蕾
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 转基因 四倍体胚胎补偿技术 小鼠
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 943-947
• 页数: 5页
• 分类号: R329.1
• 字数: 5188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2009.06.019

摘要

目的 将四倍体胚胎补偿技术与转基因相结合,构建基因打靶载体转化的胚胎干细胞(ESCs),获得小概率的同源重组事件,进而直接得到所要的突变品系. 方法 通过电穿孔的方法将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒转入ESCs,用G418筛选获得EGFP-ESCs.另外,通过电融合获得四倍体囊胚细胞,显微注射法将19～21个EGFP-ESCs注入每个四倍体囊胚腔,分别移植到假孕2.5d雌鼠子宫或假孕0.5d的输卵管内. 结果 获得稳定表达的EGFP-ESCs,染色体数目正常 (2n＝40条);四倍体细胞融合率为95.07%,囊胚发育率为95%;共获得410个重构囊胚;移植后未得到出生小鼠,但共观察到了151个着床位点,子宫移植的着床率为29.41%,输卵管移植的着床率为64.37%,获得的胚胎中EGFP蛋白有散在的表达. 结论 稳定表达的EGFP-ESCs参与到了转基因胎鼠的发育中;本实验中输卵管移植的着床率高于子宫移植的着床率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金连弘	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	59	263	8.0	12.0
2	雷蕾	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	78	381	8.0	18.0
3	单智焱	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	37	123	6.0	10.0
4	申景岭	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	29	99	6.0	9.0
5	关娜	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	8	26	4.0	5.0
6	徐燕宁	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	8	25	4.0	5.0