棉铃虫幼虫中肠细胞脂筏的制备及鉴定

• 作者: 余杰 畅宏 苏建亚 韦宏伟
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉铃虫 脂筏 中肠 刷状缘膜囊泡 OptiPrep
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: Q966
• 字数: 4491字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2009.01.005

摘要

脂筏是细胞膜上富含胆固醇、鞘脂类和糖基磷脂酰肌醇锚着蛋白的去垢剂不溶性微结构域,被认为是多种细胞膜孔毒素在细胞表面形成寡聚体的平台.为研究脂筏与Bt毒素在细胞膜上形成寡聚体膜孔的关系,本文对棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫中肠脂筏的制备与鉴定方法进行了研究.根据脂筏在低温(40℃)下不溶于去垢剂的特性,采用Triton X-100处理棉铃虫幼虫中肠刷状缘膜囊泡,溶解非脂质筏成分,以OptiPrep为介质进行密度梯度离心,分离去垢剂不溶组分,成功地得到了棉铃虫幼虫中肠上皮细胞的脂筏.冉以脂筏的特有化学成分神经节苷脂GMI作为脂筏的标志分子,利用霍乱毒素β亚基能与GM1特异性结合的特性,以辣根过氧化物酶标记的霍乱毒素β亚基用点印迹法化学发光检测神经节苷脂的分布,从而对脂筏进行定性鉴定.结果表明我们建立的脂筏制备方法简便、易行,比传统的蔗糖梯度离心法大大缩短了制备所需时间.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏建亚	南京农业大学植物保护学院	17	160	8.0	12.0
2	余杰	南京农业大学植物保护学院	3	12	2.0	3.0
3	韦宏伟	南京农业大学植物保护学院	3	12	2.0	3.0
4	畅宏	南京农业大学植物保护学院	1	0	0.0	0.0