摘要:
目的:探讨汉防己甲素(Tet)对离休兔眼角膜基质细胞抑制增殖作用,及其对增殖率和凋亡率的作用程度比较.方法:选用原代及传代兔角膜基质细胞,实验组加入含不同浓度Tet的培养液,对照组加入含等量PBS的培养液.通过免疫细胞化学技术了解细胞的PCNA表达来检测细胞增殖情况,计算增殖率并测定变化;流式细胞仪(FCM)测定细胞周期和凋亡率的变化.结果:Tet质量浓度为2μg/ml,3μg/ml,4μg/ml时,作用48 h,随着Tet浓度的增大,PCNA阳性细胞数明显减少,角膜基质细胞的增殖率呈递减趋势,存在剂量-效应关系(P<0.05);FCM结果显示,随着Tet的浓度增大,实验组G0/G1期细胞增加,细胞周期阻滞在G1期,见细胞凋亡峰,凋亡率也随浓度增大而升高[1](P<0.05);Tet对增殖率影响的曲线斜率绝对值明显大于对凋亡率作用的斜率绝对值.结论:Tet对角膜基质细胞的PCNA的表达具有明显抑制作用,随Tet浓度增大,角膜基质细胞的增殖率下降,Tet通过将细胞阻滞在G1期而发挥其抗增殖作用,且存在剂量效应关系;Tet诱导细胞凋亡,且也存在剂量效应关系,随浓度增大,凋亡率增加;在2μg/ml,3μg/ml,4μg/ml的浓度内,Tet对角膜基质细胞同时具有抑制增殖和诱导凋亡作用,但以抑制增殖作用为主.