单核细胞增生李斯特菌菌膜形成突变株的筛选

• 作者: 史贤明 朱欣娜 马瑜丹 龙飞
• 来源期刊: 中国食品学报
• 学科: 工学
• 关键词: 单核细胞增生李斯特菌 Tn917 菌膜
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-17
• 页数: 7页
• 分类号: TS2
• 字数: 4242字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7848.2009.02.003

摘要

通过对功能和调控基因的研究,探讨单核细胞增生李斯特菌菌膜的形成机制,建立防治该细菌污染食品的方法.使用电转化的方法,将携带转座子Tn917的质粒pTV1-OK转化到单核细胞增生李斯特菌中,诱导转座,获得1 880个突变株,加上前期构建的突变株,使突变库增加到2 200株.使用96孔细胞培养板对随机挑选的1 000余株突变株进行菌膜培养,结晶紫染色后测OD595值.以此值作为菌膜形成量的筛选依据,最终挑选出菌膜形成能力变小的突变株8株.目标突变获得率约8‰.对筛选的菌膜形成量变小的突变株进行荧光显微现察,证实该8株突变株菌膜形成能力弱于野生菌株.通过PCR验证,这8株突变株的基因组中插入了Tn917,这可能是它们的表型发生变化的原因.