与心肌细胞共培养的小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞分化

• 作者: 常静 张晓刚 李卫东 蒋芳萍
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 共培养 分化 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: R322.11|R329.21
• 字数: 2868字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨心肌细胞促进胚胎干细胞(ESCs)分化为心肌样细胞的诱导作用.方法 收集小鼠3.5 d胚龄的囊胚,将其培养在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,4～5 d后取内细胞团接种在饲养层上分离培养出ESCs.取3～5代ESCs,先将ESCs悬浮培养形成2～3 d的拟胚体(EBs),再与新生大鼠心肌细胞共培养诱导向心肌细胞分化,相差显微镜下观察分化细胞的形态学变化,免疫细胞荧光技术检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T(TnT)、α-肌动蛋白(α-actin)的表达.结果 诱导第3天起可见自发性、有节律跳动的拟胚体出现,12 d时第2组约有93%的拟胚体出现节律性收缩,显著高于其他各组,均表达心肌细胞特异性蛋白cTnT、β-actin,心肌细胞直接接触诱导组其分化比率达56.5%,高于其他各组,并且分化的细胞形态较单一.结论 心肌细胞和心肌细胞裂解液均可诱导ESCs向心肌细胞定向分化,且心肌细胞的诱导作用强于心肌细胞裂解液.