不同类型的转基因细胞核供体对生产小鼠转基因克隆胚胎的影响

• 作者: 关娜 单智焱 徐燕宁 李洪武 金连弘 钟淑琦 闫晓飞 雷蕾
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 核移植 转基因体细胞 电穿孔 绿色荧光蛋白 小鼠
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 409-413
• 页数: 5页
• 分类号: R329.1
• 字数: 4933字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2009.03.013

摘要

目的 利用体细胞核移植(SCNT)技术生产小鼠转基因克隆胚胎. 方法 利用所构建的含新霉素抗性(Neor)基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的双标记选择载体, 通过电穿孔的方法, 分别转染小鼠胎儿成纤维细胞和小鼠胚胎干细胞,经G418筛选14d后用于核移植.同时以未转基因小鼠卵丘细胞和成纤维细胞为核供体,进行体细胞核移植. 结果 转基因与未转基因胎鼠成纤维细胞的重构胚的囊胚(154/160)发育率为19.23%和22.91%,差异不显著(P＞0.05);转基因胚胎干细胞与胎鼠成纤维细胞的重构胚的囊胚(152/154)发育率为41.54%和19.23%,差异显著(P＜0.05);未转基因卵丘细胞与成纤维细胞的重构胚的囊胚(171/160)发育率为41.17%和22.91%,差异显著(P＜0.05). 结论 利用体细胞核移植技术,小鼠胎儿成纤维细胞和胚胎干细胞可以有效地生产小鼠转基因囊胚.