组氨酸激酶(YycG)在筛选肺炎链球菌抑制剂中的应用

• 作者: LI Nan 尹一兵 尹楠林 张雪梅 朱维良 李南 李有强 牛司强 王虹 王非 胥文春
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 组氨酸激酶 蛋白纯化 酶活性 体外筛选
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 25-29
• 页数: 5页
• 分类号: Q591
• 语种: 中文

摘要

为了获得具有体外活性的肺炎链球菌组氨酸激酶YycG并利用其筛选寻找新的抑制剂.原核表达组氨酸激酶YycG的激酶功能域,经SDS-PAGE,Western blot鉴定及镍层析柱纯化后,采用激酶试剂盒检测其激酶活性;利用对其激酶活性的抑制作用从105种候选化合物中筛选有效的抑制剂,并通过实验验证抑制剂的抗菌作用.原核表达得到约35 kDa的目的蛋白激酶域片段YycG',其纯度达95%,并具有体外水解ATP的激酶活性;利用其活性筛选得到数种不同抑制效果的小分子化合物,且体外验证具有较好的抑菌效果.通过肺炎链球菌组氨酸激酶YycG活性筛选找到的小分子抑制剂可为进一步研发与该菌相关的药物或消毒剂提供基础.