PRRSV高致病性毒株和经典毒株SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR鉴别方法的建立

• 作者: 周艳君 宋淑萍 张永欣 李曦 柴政 王小武 符芳 肖晶 蔡雪辉
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪生殖与呼吸综合征病毒 SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR 高致病性毒株 经典毒株
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 140-144
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q503
• 字数: 4242字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.02.009

摘要

根据猪生殖与呼吸综合征病毒高致病性毒株、经典毒株Nsp2基因序列的差异,应用Oligo软件设计了2对特异引物,建立了鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株的SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR方法.用该方法检测JEV、CSFV、FMDV和PRCV均呈阴性,表明该方法特异性良好;敏感性试验结果表明,该方法的最低检出量为1 TCID50/0.1 mL;批内、批间重复性试验显示,其变异系数均低于0.3%,具有良好的重复性.应用该方法对人工感染动物进行检测,自感染后第3、5、7、10、14、21 d分别采集全血,检测结果均为阳性.证实,本试验所建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可以快速、准确地鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株.