大鼠Hes1基因真核表达载体的构建及瞬时表达在神经前体细胞分化中的作用

• 作者: 徐群渊 李宝园 赵春礼 赵焕英 马存根 高福禄
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Hes1基因 Ngn1基因 pcDNA3.1质粒 神经前体细胞 细胞分化 反转录.聚合酶链式反应 大鼠
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 187-192
• 页数: 6页
• 分类号: Q813.11
• 字数: 5550字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2009.02.004

摘要

目的 探讨Hes1基因高表达对神经前体细胞分化的影响. 方法从大鼠脑组织中提取总BNA,用RT-PCR方法获得Hes1基因的全长cDNA,插入pGEM-T-Easy克隆载体中进行序列测定,测序正确后将其亚克隆至表达载体pCDNA3.1,用脂质体将重组质粒转染原代培养的神经前体细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,用RT-PCR方法鉴定Hes1基因在神经前体细胞基因组中的存在,实时荧光定量PCR检测Hes1基因在转染细胞中的过表达情况. 结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定,证实目的 基因已插入重组质粒,RT-PCR证明,经G418筛选得到的转基因神经前体细胞克隆的基因组DNA中存在Hes1基因;实时荧光定量PCR进一步证明,转基因神经前体细胞Hes1基因的mRNA高表达. 结论 构建了大鼠Hes1基因的真核表达载体,获得了高表达Hes1基因的神经前体细胞克隆.Hes1基因高表达可抑制神经前体细胞Ngn1的表达,并促进神经前体细胞向神经胶质细胞的分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐群渊	首都医科大学北京神经科学研究所	140	593	11.0	17.0
2	赵焕英	首都医科大学北京神经科学研究所	55	178	7.0	11.0
3	高福禄		48	201	9.0	11.0
4	马存根	山西大同大学医学院脑研究所	84	440	11.0	17.0
5	李宝园	山西大同大学医学院脑研究所	12	13	2.0	2.0
6	赵春礼	首都医科大学北京神经科学研究所	45	182	8.0	11.0