人骨髓CD34+干细胞分离培养及血管内皮生长因子165诱导分化的作用

• 作者: 李晓文 田映红
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: CD34+干细胞 血管内皮生长因子 免疫荧光 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1077-1080
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4938字
• 语种: 中文

摘要

背景:有研究证实,骨髓中CD34+干细胞在一定条件下具有向内皮细胞分化的潜能.目的:体外分离、纯化、培养和扩增人CD34+造血干细胞,并检测其免疫学表型,观察血管内皮生长因子对其体外诱导分化后细胞免疫表型的变化.设计、时间及地点:细胞学观察实验,于2005-10/2007-10在南方医科大学神经生物学教研室完成.材料:骨髓来源于健康供者.方法:利用Percoll梯度分离、贴壁筛选法及单克隆培养法分离培养、扩增人骨髓CD34+干细胞.采用脂质体介导转染法,选生长良好的传代细胞,以血管内皮生长因子165基因转染人骨髓CD34+干细胞.主要观察指标:采用免疫荧光和流式细胞术检测人骨髓CD34+干细胞免疫学表型.经血管内皮生长因子165基因转染后,人骨髓CD34+干细胞的表型变化以及血管内皮生长因子的分泌情况.结果:体外分离培养出高度同源性的人骨髓CD34+干细胞,细胞形态呈成纤维细胞样.CD44、CD29和c-kit阳性,CD31和CD54阴性;经血管内皮生长因子165诱导后,人骨髓CD34+干细胞表面标志CD44表达降低,CD31升高,呈现典型的内皮细胞表型,并且获得大量分泌血管内皮生长因子的能力.结论:采用Percoll分离液梯度离心继以贴壁筛选法及单克隆培养法联合筛选分离,可培养扩增}H高度同源的CD34+干细胞,经血管内皮生长因子基因转染后,CD34+干细胞呈典型的内皮细胞表型,验证了其具有向内皮细胞分化的潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓文	南方医科大学神经生物学教研室	28	147	8.0	11.0
2	田映红	南方医科大学生理学教研室	13	39	3.0	6.0