短发夹状RNA干扰bcl-2后诱导人晶状体上皮细胞凋亡的实验研究

• 作者: 卢奕 吴新华 方艳文 田洁 蒋永祥
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白内障 RNA干扰 晶体 上皮细胞 基因,bcl-2 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 636-640
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 3743字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4081.2009.07.012

摘要

目的 应用RNA干扰技术抑制人品状体上皮细胞(HLEC)bcl-2基因表达,观察诱导其细胞凋亡情况,为防治晶状体后囊膜混浊提供新的策略.方法 实验研究.设计2条以bcl-2基因为靶标的短发夹RNA(shRNA),克隆入质粒PGCsi表达载体,分别命名为P1、P2,经脂质体转染入永生性HLEC系SRA01/04,48 h后检测转染效率和bd-2的基因及蛋白表达情况,并检测HLEC的细胞凋亡情况.多组间及组间计数资料的比较,采用随机区组设计的方差分析.结果 重组质粒经自动基因测序仪测序,证实构建成功.转染后48 h,流式细胞仪测得P1、P2转染率为44.1%、47.2%.免疫印迹法测得P1、P2组的bcl-2蛋白表达较对照组降低,实时荧光定量聚合酶链反应法测得P1、P2组的bcl-2 mRNA相对表达量为0.435、0.476,较对照组降低(F=1672.4,P<0.05),流式细胞仪双染法测得P1、P2组HLEC的细胞凋亡率分别为42.3%、45.4%,较对照组增加(F=1756.2,P<0.05),并且活化型caspase-3蛋白的表达增加.结论 P1、P2可抑制HLEC的bcl-2基因表达,并诱导HLEC凋亡.(中华眼科杂志,2009,45:636-640)

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢奕	复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科	142	511	11.0	15.0
2	吴新华	复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科	12	51	4.0	7.0
3	蒋永祥	复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科	39	140	7.0	9.0
4	田洁	复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科	37	115	6.0	8.0
5	方艳文	复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科	12	26	4.0	4.0