骨髓间充质干细胞两种示踪方法的优缺点比较

• 作者: 刘畅 周敦华 岑丹阳 曾巧慧 李文益 王鹏 赖文玉
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 增强型绿色荧光蛋白 CM-DiI 细胞示踪
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 技术研究
• 页码范围: 232-236
• 页数: 5页
• 分类号: R329-33
• 字数: 4330字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2009.02.024

摘要

[目的]探讨荧光染料CM-DiI直接标记和慢病毒感染法EGFP标记人骨髓间充质干细胞(hMSC)用于体内示踪的优缺点.[方法]利用FUGW质粒构建携带EGFP基因的慢病毒载体.并感染P3代hMSC,荧光倒置显微镜下观察细胞的感染效果及传代前后细胞EGFP表达情况的变化;CM-DiI直接标记P3代hMSC,观察CM-DiI标记对细胞生物学特性的影响及传代前后细胞标记效果的变化.分别将CM-DiI和EGFP标记的P3代hMSC移植入新生大鼠左侧脑室,2周后取大鼠脑组织行冰冻切片,比较两种标记方法用于体内示踪的效果.[结果]慢病毒感染hMSC 48 h后,约40%细胞表达绿色荧光,体外培养1个月,EGFP阳性细胞数增至50%左右,荧光强度基本保持不变,细胞生长不受病毒转染的影响.CM-DiI标记hMSC 12 h后,95%以上细胞呈现很强的红色荧光,1个月后,阳性细胞减少至50%左右,荧光强度也有一定程度降低,未见染料对细胞形态和生长产生明显影响.CM-DiI标记的hMSC移植后2周脑冰冻切片可以找到红色荧光的标记细胞,EGFP标记的hMSC移植后2周脑冰冻切片未找到绿色荧光细胞.[结论]CM-DiI和EGFP均可在体外高效标记hMSC,但CM-DiI标记的hMSC体内示踪效果优于EGFP标记.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岑丹阳	中山大学附属第二医院儿科	30	197	8.0	12.0
2	李文益	中山大学附属第二医院儿科	73	434	11.0	16.0
3	王鹏	中山大学干细胞与组织工程研究中心	57	319	10.0	16.0
4	周敦华	中山大学附属第二医院儿科	78	453	11.0	16.0
5	刘畅	中山大学干细胞与组织工程研究中心	28	71	5.0	7.0
6	赖文玉	中山大学附属第二医院儿科	15	116	6.0	10.0
7	曾巧慧	中山大学附属第二医院儿科	13	75	4.0	8.0