登革2型病毒非结构蛋白NS4B的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 刘忠钰 姜涛 李晓峰 秦成峰 秦鄂德 赵慧 邓永强 陈水平
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 登革2型病毒 非结构蛋白4B 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3889字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.01.002

摘要

目的:原核表达、纯化登革2型病毒非结构蛋白NS4B,并制备其多克隆抗体,以研究其结构与功能.方法:扩增编码登革2型病毒NS4B的24-238位氨基酸残基的基因序列,并将其克隆到原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;采用蛋白浸提方法从SDS-PAGE胶中回收融合蛋白;用纯化后的融合蛋白免疫BALB/c鼠制备多克隆抗体,采用间接免疫荧光法检测抗体效价.结果:原核表达了NS4B-CST融合蛋白,并获得了其多克隆抗体,抗体效价为1:800.结论:登革2型病毒NS4B的24～238位氨基酸残基可诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,这为研究NS4B的结构与功能奠定了基础.