LDR结合毛细管电泳技术用于检测母体血浆中胎儿父系DNA点突变的可行性研究

• 作者: 周元国 易萍 李力 赵艳 郑英如 陈竹钦 颜耀华
• 来源期刊: 现代妇产科进展
• 学科: 医学
• 关键词: 连接酶检测反应 血浆DNA 产前诊断 点突变
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 401-406
• 页数: 6页
• 分类号: R714.15
• 语种: 中文

摘要

目的:研究DNA连接酶检测反应(LDR)技术结合毛细管电泳用于检测母体血浆中胎儿父系DNA点突变的可行性.方法:将Cy5荧光标记的LDR引物稀释成0.1～500fmol,用毛细管电泳技术(CEQ8000型遗传分析仪)检测稀释引物;然后以β地中海贫血IVS-Ⅱ-654(C→T)突变为例,将含该突变不同浓度的扩增产物为LDR模板,用LDR技术特异地识别突变,其中LDR一侧引物用Cy5荧光标记,最后用毛细管电泳技术检测连接产物.结果:遗传分析仪检测Cy5荧光标记的LDR引物灵敏度至少达到0.1fmol;该分析仪能检测含0.1fmol IVS-Ⅱ-654(C→T)突变的扩增产物为模板的LDR产物,产物峰面积随模板浓度增加而增加,而且未检测到以1000fmol无IVS-Ⅱ-654(C→T)突变的扩增产物为模板的LDR产物.结论:PCR/LDR结合毛细管电泳技术用于检测低丰度基因点突变有很高的灵敏度,有望用于检测母体血浆中胎儿DNA点突变,从而可能大大拓展母体血浆中胎儿DNA在无创性产前诊断中的应用范围.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周元国	第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心	66	298	7.0	13.0
2	李力	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	325	2225	23.0	32.0
3	赵艳	第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心	7	9	2.0	2.0
4	易萍	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	59	283	9.0	13.0
5	郑英如	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	67	410	12.0	17.0
6	颜耀华	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	31	174	9.0	11.0