副黏病毒Tianjin株NP蛋白的稳定表达及其检测

• 作者: 李梅 王卿 王文秀
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 仙台病毒 核蛋白类 遗传载体 转染 细胞系 基因表达
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 286-288
• 页数: 3页
• 分类号: R4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2009.04.014

摘要

目的:构建副黏病毒Tianjin株NP基因的真核表达载体,转染HEK293细胞,经G418筛选出稳定表达NP蛋白的细胞.方法:应用RT-PCR技术克隆副黏病毒Tianjin株NP基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+).经PCR、酶切和测序鉴定后,将构建的pcDNA3.1(+)-NP用LipofectaminenTM2000转染试剂转染HEK293细胞.应用免疫荧光法及Western Blot检测NP蛋白的瞬时和稳定表达.结果:RT-PCR扩增得到NP基因,重组质粒pcDNA3.1(+)-NP转染HEK293细胞后,经免疫荧光法检测到目的蛋白的瞬时和稳定表达.Western Blot法可见NP蛋白瞬时和稳定表达的条带.结论:副黏病毒Tianjin株NP基因在HEK293细胞可以瞬时和稳定表达,为研究副黏病毒Tianjin株NP蛋白功能与病毒致病性、宿主亲嗜性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李梅	天津医科大学基础医学院微生物学教研室	78	388	10.0	16.0
2	王卿	天津医科大学基础医学院微生物学教研室	13	49	4.0	6.0
3	王文秀	天津医科大学基础医学院微生物学教研室	13	42	4.0	6.0