摘要:
探讨拉伸应变对小鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells ,MSCs)向成骨细胞定向分化的影响.在成骨细胞诱导条件下,利用免疫组织化学和RT-PCR技术,(1)探讨0.5 Hz, 3%拉伸应变作用MSCs不同时间(15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、3 d、7 d、14 d),碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP) 、Ⅰ型胶原(TypeⅠcollagen,COL I)蛋白表达的变化以及Osterx (Osx)和骨钙素(Osteocalcin,OCN) mRNA表达的变化;(2)探讨不同拉伸应变(1%、3%和10%)作用1 h,Osx mRNA和OCN mRNA表达的变化.结果表明:(1) 3%拉伸应变作用7 d,ALP的表达最强, 14 d ALP表达减弱;3 d COL I表达同对照组相比显著增加;7 d、14 d COL I表达明显增强.(2)MSCs成骨诱导15 min,Osx mRNA开始表达,2 h Osx mRNA表达增加.0.5 Hz, 3%应变作用MSCs 15 min,Osx mRNA表达明显增加;30 min和1 h Osx mRNA的表达同成骨诱导组相比显著增强.成骨诱导 15 min, OCN mRNA未见表达,作用30 min; OCN mRNA表达丰度低;1 h OCN mRNA表达升高.0.5 Hz, 3%应变作用MSCs 15 min,OCN mRNA开始表达;作用30 min和1 h,OCN mRNA表达明显增加.(3)1%和3%应变作用MSCs 1 h,Osx mRNA的表达显著上调; 10%应变作用MSCs 1 h,Osx mRNA的表达不显著.3%的应变明显上调OCN mRNA的表达,1%和10%应变对OCN mRNA表达影响较小.提示,一定范围内的应变能促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化的进程.