摘要:
背景:睾丸移植是短时间热缺血损伤后快速进入冷缺血的过程,冷缺血时间的长短对睾丸生精功能是否存在影响目前还缺乏明确证据.目的:模拟临床睾丸移植缺血再灌注兔模型,探索睾丸移植冷缺血时间与睾丸缺血再灌注损伤的相关性.设计、时间及地点:分组设计,对比观察,于2006-05/12在武汉大学人民医院动物实验中心完成.材料:雄性3~6月龄大白兔,体质量2.5~3.5 kg,方法:采用自行设计的模拟临床睾丸移植过程的冷缺血灌注模型,对20只大白兔芹侧的睾丸采用0~4℃高渗枸橼酸腺嘌呤液恒压灌注,并浸泡于0~4℃生理盐水中低温保存,于冷缺血后1,2,4,6 h开放左侧睾丸血流.术后24 h取双侧睾丸,以右侧睾丸作自身对照.主要观察指标;苏木精-伊红染色及Johnsen评分判断睾丸损伤程度.丙二醛检测试剂盒检测每克睾丸组织中丙二醛含量.TUNEL法检测睾丸凋亡指数.结果:冷缺血1 h后可见睾丸生精上皮结构稍紊乱,2 h后生精上皮开始脱落,管腔内精子数量减少,4 h后生精上皮明显变薄,仅见少量的精子细胞,6 h后生精上皮仅可见少量精母细胞,部分呈唯Sertoli细胞表现.随冷缺血时间的延长,睾丸缺血再灌注损伤逐渐加重,Johnsen评分分值逐渐下降.睾丸组织冷缺血2 h后再灌注24 h的丙二醛水平明显高于自身对照组(P<0.05),至4 h达到最高.凋亡细胞数量随冷缺血时间的延长逐渐增多,凋亡指数高于自身对照(P<0.05).结论:冷缺血后4h再灌注会造成睾丸生精上皮的严重损害,提示睾丸移植前冷缺血时间应当控制在4 h以内.