Lactacystin诱导PC12细胞胞内嗜酸性包涵体动态变化的研究

• 作者: 张海娜 胡国华 胡馨予 陈秋惠 韩艳秋
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白酶体 帕金森病 PC12细胞 包涵体 α-synuclein
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1086-1089
• 页数: 4页
• 分类号: R742.5
• 字数: 3136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2009.11.002

摘要

目的 研究蛋白酶体抑制剂lactacystin诱导PC12细胞胞浆内嗜酸性包涵体的动态变化过程.方法 PC12细胞中加入不同浓度lactacystin(0、5、10、20μmol/L),孵育24 h后行HE染色及α-synuclein免疫组织化学染色,光镜观察包涵体变化;其中10 μmol/L lactacystin组分别于加入lactacystin后24、36、48、72、96和120 h行上述染色法,光镜观察包涵体变化.结果 lacatacystin作用于PC12细胞24 h后,HE染色显示随着浓度增加.胞浆中嗜伊红包涵体数量逐渐增多.0 μmol/L组胞浆中未看到包涵体,5 μmol/L组胞浆中有少量包涵体出现(3.33%±1.15%),10μmol/L组多数细胞胞浆出现典型球状包涵体(71.33%±4.16%),20μmol/L组几乎每个细胞胞浆中均出现嗜伊红包涵体(90.33%±3.21%),个别包涵体游离于细胞外;10 μmol/L组随着时间延长,包涵体逐渐从胞浆中游离至细胞外,其后胞浆逐渐缺失,在96 h和120 h时仅剩余胞核和球状包涵体.免疫组化染色显示:lactacystin作用24 h时,胞浆中α-synuclein免疫反应阳性物质逐渐由散在颗粒逐渐聚集成球状包涵体;随着浓度的增加和时间延长,α-synuclein染色阳性的球状包涵体游走于细胞外,胞浆逐渐缺失,至96 h和120 h时仅剩余胞核和包涵体.结论 lactacystin作用于PC12细胞后,早期在胞浆中出现散在的嗜酸性和α-synuclein免疫反应阳性的颗粒,随着浓度增加和时间延长,颗粒状物质在核旁聚集,最终形成固缩的包涵体,细胞外包涵体可独立存在.这种包涵体的动态变化过程与以人类帕金森病为代表的神经变性疾病中的包涵体非常相似,可以作为研究包涵体相关问题的有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海娜	吉林大学第二临床学院康复医学科	32	248	7.0	15.0
2	陈秋惠	吉林大学第二临床学院神经内科	52	206	9.0	12.0
3	胡国华	吉林大学第二临床学院神经内科	45	257	9.0	12.0
4	韩艳秋	吉林大学第二临床学院神经内科	29	123	7.0	10.0