摘要:
生长激素释放激素(GHRH)与垂体腺苷酸环化酶(PACAP)在序列及功能方面均相似,且同为PACAP/胰高血糖素超家族成员.研究了这二者对生长激素释放的刺激作用,以及对动物生长的影响.构建了3个表达载体,pIRESI-GHRH-PACAP(P-G-P),pIRESI-GHRH(P-G)及pIRESl-PACAP(P-P),并转染到CHO细胞中,进行RT-PCR,Dot-ELISA以及Westen-blot检测.此外,给大鼠注射细胞上清表达产物,检测其生物学活性.注射8 h后,注射表达P-G-P上清的大鼠血清中IGF-I浓度显著高于其他组(P<0.05).用PLGA微球包裹各种质粒,并注射到家兔后肢胫前肌.观察家兔生长情况,并于注射后0,15,30,45天时分别采集家兔血液,检测血液中IGF-I浓度.结果显示,三质粒注射组动物体重变化及血液中IGF-I浓度均高于对照组.注射后30天时,P-G-P组增重较对照组提高81%(P<0.01),P-G组比对照组提高15%(P>0.05),P-P组比对照组高7%(P>0.05).另一方面,P-G-P组动物血液中IGF-I含量比分别比P-G、P-P及对照组提高16.68%(P>0.05),17.14%(P>0.05),50.46%(P<0.05).以上结果揭示:给动物注射PLGA微球包裹的共表达GHRH与PACAP质粒,可以增强动物体内生长激素(GH)的分泌,并促进动物生长.通过上述研究发现,肌肉注射PACAP表达质粒可以促进家兔的生长,PACAP和GHRH共表达可以起到协同作用.这可能为动物的促生长研究提供新的方法.