小鼠胚胎肝干细胞体外向肝样细胞的诱导分化

• 作者: 余强峰 尹震宇 王效民 赵文秀
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肝干细胞 分化 小鼠 胚胎
• 年，卷（期）: 2009,（36）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7103-7107
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4494字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.36.020

摘要

背景:目前肝干细胞尚无特异性标志物,故其分离、培养尤其是纯化技术尚不成熟.目的:观察体外培养的小鼠胚胎肝干细胞生物学特性,及其向肝样细胞的诱导分化能力.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-01/06在厦门大学附属中山医院消化中心实验室完成.材料:SPF级BALB/c胎鼠20只,13.5 d龄,由厦门大学生命科学学院实验动物中心提供.方法:无菌操作取出胎鼠肝脏,用细胞刮梳理后用Ⅳ型胶原酶消化.取分离纯化后的第2代细胞进行免疫荧光染色.细胞培养到第3代时,分别用3mmol/L丁酸钠盐与0.1%DMSO进行诱导,5 d后收集细胞进行Western blotting实验.主要观察指标:胚胎肝干细胞的形态及表面分子的表达,诱导后胚胎肝干细胞mRNA与蛋白水平的变化.结果:分离培养的细胞第2代即可得以纯化,呈克隆样生长,高表达白蛋白、甲胎蛋白、C-met及角蛋白19,且多数细胞共表达白蛋白与角蛋白19、C-met与角蛋白19,双阳性率约80%.细胞诱导后肝细胞标志物白蛋白表达明显增加,而作为不成熟肝细胞的经典标志物甲胎蛋白表达减少,同时干细胞标志物c-kit mRNA水平也明显下降,角蛋白19水平无明显变化.结论:胚胎肝干细胞具有双向分化潜能,经丁酸钠盐与DMSO诱导后可以向肝样细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王效民	厦门大学附属中山医院肝胆外科	56	249	8.0	12.0
2	尹震宇	厦门大学附属中山医院肝胆外科	28	122	7.0	9.0
3	赵文秀	厦门大学附属中山医院肝胆外科	12	53	4.0	6.0
7	余强峰	厦门大学附属中山医院肝胆外科	1	3	1.0	1.0