胎猪胰腺干细胞扩增及诱导

• 作者: 杨春荣 楚元奎 王华岩 王赟 窦忠英
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 农学
• 关键词: 胰岛 胰腺干细胞 糖尿病 免疫组织化学 胎猪
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 83-86
• 页数: 4页
• 分类号: S185
• 字数: 3828字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2009.01.017

摘要

目的 寻找胰腺干细胞扩增方法,为研究糖尿病的细胞治疗提供种子细胞.方法无菌采集胎猪胰腺,经胰酶消化,以含10%血清的RPMI1640培养基培养.细胞长满皿底85%时,用胰酶消化传代,传代5～6次后细胞活力下降,细胞大量死亡漂浮,留下少数贴壁的小圆细胞.将培养基中的血清浓度提高到15%,贴壁的小圆细胞能快速增殖并形成细胞克隆,4～6d便可融汇成单层.采用免疫组织化学方法对所获得的的细胞进行胰腺干细胞特征检测.结果经上述方法处理的细胞具有旺盛的增殖能力,可以连续传代,目前已传至64代.采用免疫组织化学检测细胞表达胰腺干细胞特征性标志物,胰肠同源域因子1(PDX-1)、葡萄糖转运子2(GLUT-2)、巢蛋白、波形蛋白;经诱导后细胞表达胰腺内分泌细胞的标志为胰高血糖素、胰岛素、生长抑索、胰多肽.结论通过该方法可以获得大规模扩增的胰腺干细胞,该细胞在体外诱导可分化形成胰腺内分泌部4种主要细胞.