靶向EGFR基因RNA干扰对人卵巢癌SKOV_3细胞增殖的抑制作用

• 作者: 吴永忠 李少林 郭启帅 黄曦
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 表皮生长因子受体 SKOV_3细胞 细胞周期 凋亡
• 年，卷（期）: 2009,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2338-2341
• 页数: 4页
• 分类号: R329.25|R394.2|R737.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.23.013

摘要

目的 利用RNA干扰技术下调表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的表达,观察其对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响.方法 构建针对EGFR基因的siRNA真核表达载体,转染入卵巢癌SKOV_3细胞中,并筛选稳定表达siRNA的转化克隆,RT-PCR及Western blot分别检测EGFR mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,克隆形成实验及MTY法检测细胞克隆形成率及细胞体外的增殖情况.结果 成功构建表达质粒pGenSil-HK、pGcnSil-EGFRI和pGenSil-EGFR2,并转染SKOV,细胞,通过G418筛选后获得稳定转染克隆,RT-PCR及Western blot分析表明转染pGenSil-EGFRI、pGenSil-EGFR2后的细胞EGFR mRNA和蛋白表达均受到了明显抑制,FGFR mRNA抑制率分别为41.87%和68.07%,蛋白表达抑制率分别为45.21%和70.25%.与未转染组和pGenSil-HK组相比,pGenSil-EGFR2组细胞凋亡比例显著增加,G_1期细胞增多,而S期细胞减少(P<0.05);转染pGenSil-HK组克隆形成率为(0.82±0.03),转染pGenSil-EGFR2组克隆形成率为(0.61±0.04),二者比较差异显著(P<0.05),MTT显示细胞培养36 h后,pGenSil.EGFR2组的细胞生长均显著低于未转染组和转染pGenSil-HK组(P<0.05).结论 靶向EGFR基因RNA干扰能够阻抑卵巢癌SKOV_3细胞中的EGFR表达,诱导细胞凋亡、调控细胞周期再分布、抑制细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李少林	重庆医科大学放射医学教研室	232	1134	14.0	22.0
2	黄曦	重庆医科大学附属第一医院血液科	15	140	7.0	11.0
3	郭启帅	重庆医科大学放射医学教研室	15	64	4.0	7.0