人pre-miR-15a真核表达载体的构建及其对Raji细胞生长的抑制作用

• 作者: 何冬梅 谌琴
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: pre-miR-15a Raji细胞 淋巴瘤
• 年，卷（期）: 2009,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2334-2337
• 页数: 4页
• 分类号: R394-33|R394.2|R73-362
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.23.012

摘要

目的 构建人pre-miR-15a真核表达载体,并研究其对Raii细胞的生长抑制作用.方法 将pre-miR-15a与目标载体(PGCSIL-GFP)定向连接,转化细菌感受念细胞,PCR鉴定阳性克隆,并测序.利用脂质体法将该载体转染Raji细胞,实验分为空白对照组、阴性对照质粒组和pre-miR-15a组(n=5).RT-PCR检测Bel-2 mRNA表达,间接免疫荧光法检测Bcl-2蛋白表达,台盼蓝细胞计数法检测细胞增殖活性.结果 PCR 阳性克隆鉴定及测序结果 均与日的序列一致.倒置荧光显微镜下见绿色荧光表达;RT-PCR法示各组间Bcl-2 mRNA表达差异无显著性(P>0.05);间接免疫荧光法示pre-miR-15a组的Bcl-2蛋白表达量较空白对照组和阴性对照质粒组显著降低(P<0.05);台盼蓝拒染法示pre-miR-15a组Raji细胞生长受抑.结论 本实验成功构建了per-miR-15a真核表达载体,且pre-miR-15a可以抑制Raji细胞生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何冬梅	暨南大学医学院血液病研究所	82	404	11.0	16.0
2	谌琴	暨南大学医学院血液病研究所	3	11	1.0	3.0