降低Twist1表达可以增加鼻咽癌细胞系HNE1对紫杉醇的敏感性

• 作者: 孟大为 暴继敏 李丹 李哲 李素洁 马云鹏
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤细胞,培养的 鼻咽肿瘤 癌,鳞状细胞 Twist转录因子 紫杉酚 药物耐受性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 504-508
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4053字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2009.06.014

摘要

目的 研究降低Twist1表达可否改变鼻咽癌细胞系HNE1对紫杉醇的敏感性.方法 用包含Twist1小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列的表达质粒转染HNE1细胞,以新霉素(400 μg/ml)筛选阳性克隆,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法鉴定Twist1蛋白的低表达.通过Annexin V-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)-碘化丙啶(propidium iodide,PI)双标法和观察DNA降解的方法分析si-Twist1 HNE1细胞对紫杉醇的敏感性,采用实时PCR技术分析凋亡相关基因的表达,流式细胞周期分析和叫甲基偶氮唑蓝(MTT)方法分析降低Twist1表达是否影响HNE1细胞增殖.结果 Annexin V-FITC-PI双标法检测结果显示,10 ng/ml紫杉醇处理后,si-Twist1 HNE1细胞的凋亡率为40.2%,显著高于对照siRNA组的24.3%,差异有统计学意义(t=56.999,P=0.000);恢复Twist1蛋白的表达,紫杉醇引起的凋亡率在低Twist蛋白表达组为44.80%±4.80%(x±s,下同),在高表达组为27.00%±2.91%,差异有统计学意义(t=4.374,P=0.049).实时PCR实验结果显示,紫杉醇处理的HNEI细胞中si-Twist组凋亡相关蛋白B淋巴细胞(bcl)-2的相对表达量为0.28±0.05,显著低于对照siRNA组的0.57±0.08,差异有统计学意义(t=6.710,P=0.021);而bax和bcl-XL基因的转录水平没有明显改变(t值分别为2.000和1.502,P值均>0.05).MTT实验和流式细胞术检测显示Twist表达降低没有影响HNE1细胞增殖(P值均>0.05).结论 降低Twist1表达可能是通过诱导凋亡提高了细胞对化疗药物敏感性,提示Twist蛋白可望成为一项新的鼻咽癌治疗靶标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	暴继敏	辽宁省金秋医院耳鼻咽喉科	31	266	8.0	15.0
2	马云鹏	辽宁省金秋医院耳鼻咽喉科	18	95	6.0	8.0
3	孟大为	辽宁省金秋医院耳鼻咽喉科	28	134	7.0	10.0
4	李哲	辽宁省友谊医院耳鼻咽喉科	6	22	3.0	4.0
5	李素洁	辽宁省金秋医院耳鼻咽喉科	1	8	1.0	1.0
6	李丹	辽宁省金秋医院耳鼻咽喉科	3	16	2.0	3.0