人骨髓间充质干细胞体外向肝样细胞的诱导分化

• 作者: 吴炜 陈瑜 马兆文
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 间充质干细胞 人骨髓间充质干细胞 肝样细胞 细胞因子
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 418-421,425
• 页数: 5页
• 分类号: Q254
• 字数: 3278字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2009.05.002

摘要

目的:研究人骨髓来源的间充质干细胞(human bone marrow derived mesenchymal stem cells,hBM-MSCs)在肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子 -4(FGF-4)、抑瘤素M(OSM)诱导下,体外向肝样细胞的诱导分化.方法:通过密度梯度离心和贴壁培养法获得hBM-MSCs,分离的hBM -MSCs扩增传至第6代,流式细胞仪检测hBM-MSCs表面CD34、CD45、CD105、CD166表达.第6代hBM -MSCs生长达100%融合时采用两步法对hBM-MSCs进行诱导分化.第1～第14天采用IMDM诱导培养基(含2% FCS、20 ng/mL HGF、20 ng/mL FGF-4),第15～第21天在上述培养基中加OSM(10 ng/mL),促进诱导细胞的成熟,同时收集第0、第7、第14、第21天培养上清液标本,ELISA法测ALB浓度.诱导培养21 d后采用RT-PCR、免疫荧光技术检测诱导后肝细胞特异标志CK18、ALB的表达,PAS染色检测诱导MSCs糖原储存.结果:传至第6代的hBM-MSCs CD34、CD45表达阴性,CD105、CD166表达阳性.在细胞因子的作用下,经过21 d的体外培养,hBM-MSCs形态发生变化,由长梭形变为多边形、类圆形,并具有肝细胞特异的表型和功能.RT -PCR可检测到CK18、ALB表达,免疫荧光可检测到诱导后细胞内CK18、ALB,培养上清中有ALB的分泌,且诱导后的肝样细胞内有糖原储存.结论:hBM-MSCs体外能转化为具有肝功能的肝样细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈瑜	浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室	148	1073	15.0	26.0
2	吴炜	浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室	37	297	8.0	16.0
3	马兆文	温州医学院检验医学院	1	5	1.0	1.0