多重PCR-反向线点杂交技术在检测女性念珠菌和阴道毛滴虫感染中的应用

• 作者: 向华国 樊超 熊礼宽 赵良玉 黄玉佳
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 核酸杂交 阴道毛滴虫 念珠菌 寡核苷核探针
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 529-531
• 页数: 3页
• 分类号: R394|R537.7
• 字数: 2437字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立和评价多重PCR-反向线点杂交技术(mPCR-RLB)快速同时检测阴道毛滴虫和念珠菌感染的方法.方法 分别选择阴道毛滴虫特异性DNA重复序列设计一对特异性引物,以念珠菌属28s rRNA 至5.8s rRNA间隔序列Ⅱ(ITS2)为靶基因设计一对检测念珠菌的通用引物,构建二重PCR同时扩增阴道毛滴虫、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念球菌、近平滑念珠菌、都柏林念株菌DNA,然后与通过氨基标记固定在尼龙膜上的各特异性寡核苷核探针杂交,并对女性阴道试子标本进行检测.结果 多重PCR可同时扩增阴道毛滴虫、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念球菌、近平滑念珠菌、都柏林念株菌临床或标准菌株DNA,上述念珠菌标准菌株可扩增出302～441bp DNA片段,阴道毛滴虫临床株可扩增出262bp DNA片段.6种念珠菌和阴道毛滴虫的特异性寡核苷酸探针可分别与其相应的PCR产物杂交.通过对150例女性阴道试子进行检测,mPCR-RLB检测念珠菌的阳性率为47.33%,阴道毛滴虫的阳性率为6.67%,二者同时阳性率为1.33%.而培养法检测念珠菌阳性率为36.00%,阴道毛滴虫的阳性率为2.00%,二者同时阳性率为0.67%.明显高于培养法(P<0.05).结论 多重PCR-RLB可快速同时检测念珠菌和阴道毛滴虫,为女性阴道炎的临床诊断提供了一种可靠的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊礼宽		38	198	9.0	12.0
2	向华国		14	61	5.0	7.0
3	樊超		8	29	4.0	5.0
4	黄玉佳		3	4	2.0	2.0
5	赵良玉		1	2	1.0	1.0