人乳头瘤病毒关键基因在裸鼠体内表达的初步研究

• 作者: 卜友泉 宋方洲 徐营 易发平 曹利仙 潘巍巍 赖国旗
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳头状瘤病毒,人 腺病毒 基因,E6/E7 小鼠,裸
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 209-214
• 页数: 6页
• 分类号: R373.39
• 字数: 4662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.02.001

摘要

目的:初步研究HPV16 E6/E7基因在裸鼠体内不同组织引起的病变.方法:将重组腺病毒Ad-CMV-E6/E7、Ad-K14-E6/E7病毒上清以及作为对照的重组腺病毒空载体pAd-CMV和pAdtrack的上清液,经过纯化后,通过裸鼠的尾缘静脉注射到裸鼠体内,并每天注射0.05 mg雌激素到注射病毒的裸鼠,同时做阴性对照.12周后给裸鼠注射2.5%阿佛丁进行麻醉,并将其耳朵、头颈部皮肤、口腔黏膜、结肠、直肠、子宫颈-阴道移行区等组织取出,浸泡在3.75%多聚甲醛中4 ℃固定过夜,然后做石蜡包埋切片、HE染色、免疫组化检测P53蛋白和Bcl-2的表达,取裸鼠的各个组织提取DNA、RNA和蛋白质,然后分别检测有无重组腺病毒的感染、病毒表达的情况及E6蛋白的表达.结果:实验组1注射腺病毒Ad-K14-E6/E7的裸鼠组织HE染色结果显示裸鼠子宫颈-阴道移行处的增生较明显.SP法免疫组化发现突变型P53和Bcl-2在该组裸鼠的子宫颈-阴道移行处表达都增加(P<0.05),并且RT-PCR检测子宫颈-阴道移行处组织也有E6/E7的表达,Western blotting检测该组织也有E6蛋白的表达.结论:K14启动子增加了E6/E7在裸鼠子宫颈-阴道移行处的表达,并且使子宫颈-阴道移行处的上皮组织发生病变.