肌球蛋白轻链激酶介导缺氧后肠上皮屏障功能紊乱的研究

• 作者: 李牧 王凤君 王裴 陈传莉
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧 肌球蛋白轻链 肌球蛋白轻链激酶 肠上皮细胞 屏障功能
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 57-60
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 2794字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2009.01.021

摘要

目的 了解肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在缺氧后肠上皮屏障功能损害中的作用.方法 建立单层肠上皮细胞缺氧模型,根据缺氧时间不同将细胞分为正常对照组(缺氧0 h),缺氧2、6、8、12、24 h组,(5-氯萘-1-磺酰)-1-六氢-1,4-双苯妥英钠(ML-9)处理组(缺氧6 h并用终浓度为100μmol/L的MLCK特异性抑制剂ML-9处理).用电阻仪测定单层肠上皮细胞跨细胞电阻(TER);免疫荧光法检测单层肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1的变化;蛋白质印迹法检测肠上皮细胞磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)及MLCK蛋白表达.结果 缺氧6、8、12、24 h组单层肠上皮细胞TER值分别为(422±17)、(427±27)、(403±40)、(426±22)Ω,均低于正常对照组[(451±27)Ω,P<0.05],ML-9处理组为(558±110)Ω,显著高于各单纯缺氧组(P<0.01).缺氧6 h组单层肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1发生明显改变,主要表现为不规则,出现明显皱褶、圆滑排列程度减弱,甚至有断裂及锯齿等不连续现象.ML-9组肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1近似于正常对照组,排列较规则,皱褶及锯齿状改变较单纯缺氧组减少或消失.各单纯缺氧组肠上皮细胞MLCK、p-MLC蛋白表达水平均较正常对照组增加.结论 MLCK可介导缺氧引起的肠上皮屏障功能紊乱.