HL-60细胞向单核系和粒系分化的比较蛋白质组学研究

• 作者: 唐薇 王伟佳 邱宗荫
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病 HL-60细胞 细胞分化 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 143-148
• 页数: 6页
• 分类号: R733.7
• 字数: 4365字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2009.02.007

摘要

背景与目的:已有研究发现NSC67657和全反式维甲酸可以诱导HL-60细胞分别向单核系和粒系分化.本研究比较分析不同诱导剂诱导HL-60细胞向单核系和粒系分化前后以及分化中的蛋白表达差异,发现与单核系和粒系分化有关的关键蛋白.方法:分别采用粒系分化诱导剂全反式维甲酸和单核系分化诱导剂NSC67657诱导HL-60细胞分化,MTT法检测细胞增殖情况:流式细胞技术分析细胞表面特异性分化抗原(CD11b/CD14)的表达,根据CD14表达情况计算细胞分化百分率;细胞化学染色对HL-60的两系分化进行验证.改良双向电泳分离技术对HL-60细胞全蛋白进行分离,PDQuest软件分析寻找差异蛋白点.基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对蛋白点进行分析.RT-PCR和免疫印迹对差异蛋白ICAT进行验证.结果:全反式维甲酸和NSC67657均抑制HL-60细胞增殖,并分别诱导HL-60细胞向粒系和单核系分化.在2μmol/L ATRA和10 μmol/L NSC67657作用5 d后,CD11b和CD14的表达均在90%以上,细胞化学染色支持细胞两系分化的结论.蛋白质组学分析表明,HL-60细胞分别向粒系和单核系分化后.有25个差异蛋白点的变化趋势在两系分化中是相同的,有10个差异蛋白点在单核系分化后表达有差异.有15个差异蛋白点在粒系分化后表达有差异;ICAT是其中差异蛋白之一,通过基因和蛋白水平验证,发现ICAT在NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化过程中表达升高,而在粒系和非处理细胞中表达无显著性差异.结论:双向电泳/MOLDI-TOF MS对HL-60细胞分化前后细胞全蛋白进行分析,发现了一批与两系分化有关的蛋白分子,为关键蛋白的筛选及其功能研究提供了重要的启示.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟佳	重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室	5	17	3.0	4.0
2	唐薇	重庆医科大学药物分析化学教研室	5	14	3.0	3.0