同位素标签技术在人肾小管上皮细胞蛋白质组学研究中的应用

• 作者: 张文 张群业 李娅 王伟铭 陈晓农 陈楠 陈永熙 黄秋花
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 相对和绝对定量的同位素标签试剂 定量蛋白质组学 人肾小管上皮细胞
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 513-516
• 页数: 4页
• 分类号: Q51
• 字数: 3672字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立并优化人肾小管上皮细胞蛋白质组学分析所需的相对和绝对定量的同位素标签试剂(iTRAQ)标记技术,为进一步研究奠定基础.方法 将人肾小管上皮细胞株HK-2通过细胞裂解、丙酮沉淀、蛋白变性、还原及酶解,最后进行iTRAQ标记和质谱鉴定,研究iTRAQ在HK-2细胞的标记情况和蛋白质组学.结果 通过质谱检测,检测到带有iTRAQ标记肽段.随机选取20个前体离子,通过3次重复试验,鉴定出iTRAQ标记多肽肽段分别为17、15和18个,标记效率在75.5% ～90.0%,且组间标记效率差异无统计学意义(P>0.05).结论 iTRAQ可以在HK-2细胞中标记效果满意,且重复性较好,为进一步研究肾脏疾病的蛋白质组学奠定了基础.