C型口蹄疫病毒VP1基因的原核表达及重组蛋白的纯化

• 作者: 丛国正 冯金瑞 刘萍 常惠芸 林彤 独军政 邵军军
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: C型口蹄疫病毒 VP1基因 表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3318字
• 语种: 中文

摘要

利用PCR技术扩增获得C型口蹄疫病毒VP1基因,将其克隆到原核表达载体pET-30α(+)上,构建重组表达质粒pET-VP1.质粒pET-VP1转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导VP1基因的表达,收集不同时间的菌液进行SDS-PAGE、Western blot分析,结果得到分子量约为33 ku的目的条带,表达产物占菌体总蛋白的35%,且该目的条带能被C型FMDV阳性血清识别,说明VP1基因在大肠杆菌中得到高效表达.融合表达蛋白经镍柱纯化,重组蛋白纯度达90%以上.