中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05 α-淀粉酶基因的克隆和原核表达

• 作者: 康壮丽 胡文革 赵建朋 郝凤霞
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 中度嗜盐菌 α-淀粉酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 168-171
• 页数: 4页
• 分类号: Q949.3
• 字数: 3204字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2009.09.040

摘要

本实验室从新疆盐湖分离得到一株产α-淀粉酶中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05,根据已报道的α-淀粉酶基因(α-AMY)序列的保守区域设计引物,从中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05基因组中扩增出α-淀粉酶基因片段,将α-淀粉酶基因纯化后克隆到pGM-T载体上测序,结果表明α-淀粉酶基因片段长约1500bp,与地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis的α-淀粉酶基因序列的同源性为95%,两种序列具有一定的同源性.按正确的阅读框架将α-淀粉酶基因片段定向克隆到表达载体pET-32a上,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,α-淀粉酶基因能在大肠杆菌BL21中成功表达,确定表达蛋白的相对分子量为61kD左右,与理论推导的分子量相一致;构建的大肠杆菌工程菌,所产生的α-淀粉酶是包涵体,通过超声波粉碎仪粉碎后,测α-淀粉酶酶活为原菌的1.8倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡文革	石河子大学生命科学学院	37	347	10.0	17.0
2	康壮丽	石河子大学生命科学学院	6	27	3.0	5.0
3	郝凤霞	石河子大学生命科学学院	7	30	3.0	5.0
4	赵建朋	石河子大学生命科学学院	5	27	3.0	5.0