携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘革力 卜友泉 宋方洲 易发平 汪长东 程莉 袁成福 黄秀凝
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 逆转录病毒载体 shRNA NFBD1基因 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 87-91
• 页数: 5页
• 字数: 3760字
• 语种: 中文

摘要

建立逆转录病毒介导的NFBD1基因RNA干扰表达体系,并观察其在宫颈癌SiHa细胞中对NFBD1表达的影响.将人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段重组到pSUPER Retro质粒中,构建携带人NFBD1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-NFBD1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株SiHa细胞,并用嘌呤霉素筛选产生稳定的细胞克隆,用实时荧光定量PCR和Westernblotting检测细胞中NFBD1 mRNA和蛋白表达的变化.重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确;逆转录病毒感染SiHa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;实时荧光定量PCR和Westernblotting检测人NFBD1 mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组.携带人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染SiHa细胞后能明显抑制NFBD1 mRNA和蛋白表达,为进一步研究NFBD1在宫颈癌中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易发平	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	45	167	7.0	10.0
2	刘革力	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	36	57	4.0	6.0
3	卜友泉	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	51	139	7.0	10.0
4	汪长东	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	12	25	2.0	4.0
5	袁成福	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	14	15	2.0	3.0
6	程莉	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	13	7	2.0	2.0
7	黄秀凝	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	3	4	1.0	2.0