不同方法诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞的分化

• 作者: 包普花 宋琳 张焕相 徐路尧 王敏 钱燕翔
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 诱导分化 神经样细胞 丁羟基茴香醚 全反式维甲酸
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 197-200,封2
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2+1
• 语种: 中文

摘要

目的 观察两种方法体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向神经样细胞分化的效果.方法 自大鼠股骨中提取骨髓细胞,利用Pewoll法进行BMSC分离、纯化及鉴定.取第5代细胞,应用两种方法进行诱导.方法 一(BHA组):200 μmol/L丁羟基茴香醚(BHA)、10 ng/ml碱性成纤维生长因子(bFGF)和2%二甲基亚砜(DMSO)联合诱导细胞;方法二(RA组):全反式维甲酸(RA)和β-巯基乙醇(β-ME)联合诱导细胞.同时设正常培养的BMSC为对照组.实验过程中对细胞进行形态观察和免疫荧光染色检测神经细胞标志物.结果 BHA组诱导5 h,细胞即发生明显的形态改变,出现胞体回缩、突触伸展等神经干细胞的形态特征,而RA组诱导1周未出现神经干细胞形态.免疫荧光染色显示两种方法诱导的细胞均能表达神经前体细胞标志物nestln、β-tubulin和成熟神经元标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE),不表达星形胶质细胞标志物胶质原纤维酸性蛋白(GFAP).BHA组与RA组表达NSE的阳性率分别为80.05%和71.61%,两者相比,差异无统计学意义(P>0.05);对照组不表达NSE,诱导组与对照组比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 两种方法均能诱导骨髓间充质干细胞定向分化为表达神经细胞标志物的神经样细胞.