重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究

• 作者: 廖文艳 王瑞琴 邵昱昊 韩宗玺 马得莹
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡β-防御素-6 遗传进化 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 476-480
• 页数: 5页
• 分类号: S852.42
• 字数: 4046字
• 语种: 中文

摘要

从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过RT-PCR扩增出鸡β-防御素-6(AvBD6)基因.经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为204 bp,编码68个氨基酸残基.根据已发现的禽β-防御素和鼠β-防御素-6的氨基酸序列构建系统进化树.发现鸡AvBD6氨基酸序列与鸡AvBD7氨基酸序列同源性最高,为62.7%.将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,进行原核表达.SDS-PAGE电泳表明,表达的重组鸡AvBD6融合蛋白分子量约为32 ku.对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定.结果表明,重组鸡AvBD6融合蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌的抗菌活性较弱,对猪霍乱沙门氏菌无抗菌活性.重组鸡AvBD6蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度范围为31.25μg/mL～250 μg/mL.此外,重组鸡AvBD6蛋白对温度和酸碱度有较高的稳定性.