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摘要:
目的 构建针对乙型肝炎病毒P基因编码区、能在体内转录产生发夹状小干扰RNA(siRNA)的表达载体psiHBV/p,观察RNA干扰对HBsAg、HBeAg及乙型肝炎病毒DNA复制的抑制作用.方法 针对HBV-P基因区特异序列,构建siRNA的表达载体psiHBV/p.采用脂质体介导方法将其与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV1.3共转染HepG2细胞.分别于转染后24小时、48小时、72小时用ELISA法对HepG2细胞培养上清液进行HBsAg、HBeAg的检测;于转染后72小时通过FQ-PCR法分析RNA干扰作用对HBVDNA的抑制效果.结果 成功构建了针对HBV-P基因区的siRNA的真核表达重组体psiHBV/p,并发现它能明显抑制HBsAg及HBeAg的分泌,转染后第二天抑制率达高峰,分别为84%、65%.FQ-PCR结果也证实了转染72小时后,随psiHBV/p比例的升高,其对HBVDNA的抑制作用也随之增加.结论 成功构建的psiHBV/p,它能在体内持续转录产生针对P基因转录体的发夹状siRNA;在细胞水平上,体内转录产生的、针对乙型肝炎病毒P基因区特异序列的siRNA对共转染的重组载体pHBV1.3有显著和特异的抑制作用.
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文献信息
篇名 针对HBV-P基因的RNA干扰抑制乙型肝炎病毒的研究
来源期刊 临床内科杂志 学科 医学
关键词 乙型肝炎病毒 RNA干扰 基因治疗
年,卷(期) 2009,(7) 所属期刊栏目 临床基础研究
研究方向 页码范围 486-489
页数 4页 分类号 R373.2
字数 3880字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1001-9057.2009.07.019
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李自显 河南安阳地区医院消化内科 1 0 0.0 0.0
2 李丽萍 河南安阳地区医院消化内科 1 0 0.0 0.0
3 丁大瑞 河南安阳地区医院消化内科 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
乙型肝炎病毒
RNA干扰
基因治疗
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
临床内科杂志
月刊
1001-9057
42-1139/R
大16开
湖北省武汉市武昌区东湖路165号
38-93
1984
chi
出版文献量(篇)
7611
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16
总被引数(次)
38918
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