高迁移率族蛋白B1对大鼠脾脏树突状细胞细胞因子表达的影响

• 作者: 于燕 刘峰 姚咏明 姚风华 徐姗 董宁
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高迁移率族蛋白B1 树突状细胞 白细胞介素-12 肿瘤坏死因子-α 免疫调节
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 脓毒症
• 页码范围: 127-131
• 页数: 5页
• 分类号: R6
• 字数: 3437字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2009.02.003

摘要

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对树突状细胞(dendritic cells,DC)细胞因子蛋白合成和基因表达的影响.方法 分离正常Wistar大鼠脾脏DC后置于96孔培养板(1×105/孔),给予重组HMGB1刺激,研究HMGB1刺激与TNF-α,IL-12蛋白合成和基因表达的时间-效应关系,24孔细胞随机分为6组:正常对照24 h组(4孔/组)、正常对照48 h组(4孔/组)、正常对照72 h组(4孔/组)、HMGB1 24 h组(4孔/组)、HMGB1 48 h组(4孔/组)和HMGB1 72 h组(4孔/组),后3组分别以1 μg/mLHMGB1 刺激.刺激相应时间检测TNF-α,IL-12 mRNA的表达和蛋白水平.研究HMGB1刺激与TNF-α,IL-12蛋白合成和基因表达的剂量-效应关系,16孔细胞随机分为4组:正常对照组(4孔/组)、0.1μg/mL组(4孔/组)、1 μg/mL组(4孔/组)和10 μg/mL组(4孔/组),分别以相应剂量HMGB1刺激.刺激后48 h后检测TNF-α、IL-12 mRNA的表达和蛋白水平.应用Promega公司mRNA提取试剂盒裂解收集的DC,提取细胞mRNA.采用SYBR Green real-time(实时荧光定量)PCR技术检测TNF-α mRNA,IL-12mRNA表达水平.以三磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)作为内参对照.扩增产物经Fast 7500 real-time PCR仪处理,作相对定量(RQ)分析.以ELISA试剂盒检测各组上清中IL-12,TNF-α蛋白水平.数据进行单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 1 μg/mL HMGB1 刺激后,脾脏DC IL-12,TNF-α蛋白合成和基因表达均分别于24～72 h明显上调(P<0.05或P<0.01),其中以作用48 h后其表达上调尤为显著(P<0.01);0.1/.μg/mL,1 tcVmL,10μg/mL HMGB1刺激48 h均可诱导DC IL-12、TNF-α蛋白合成和基因表达增强(P<0.01),其中HMGB1浓度在1 μg/mL时,DC IL-12和TNF-α蛋白合成和基因表达表达最明显(P<0.01).结论 HMGB1诱导DC成熟分化过程中能促进DC合成、释放IL-12和TNF-α,从而发挥其免疫调节作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚咏明	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部	298	2402	21.0	30.0
2	于燕	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部	42	273	9.0	14.0
3	董宁	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部	65	323	9.0	12.0
4	刘峰	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部	9	56	4.0	7.0
5	徐姗	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部	5	31	3.0	5.0
6	姚风华	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部	2	2	1.0	1.0