上皮型钙粘蛋白基因稳定转染小鼠胚胎干细胞及对分化细胞黏附能力的影响

• 作者: 何晓顺 胡安斌 蔡继业 黄冰
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 上皮型钙粘蛋白 基因转染 细胞黏附
• 年，卷（期）: 2009,（49）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 9787-9791
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 2162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.49.040

摘要

背景:在胚胎期,上皮型钙粘蛋白的表达对于肝组织的形成有决定作用.目的:将上皮型钙粘蛋白基因转染小鼠胚胎干细胞,观察其对分化细胞间黏附能力变化的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-12/2008-12在中山大学附属第一医院外科实验室完成.材料:清洁级BALB/c系孕13 d小鼠由中山大学实验动物中心提供.BAL8/c系小鼠胚胎干细胞由中山大学眼科中心黄冰教授建系和保存.含CMV启动子的真核表达质粒pEGFP-N1由中山大学医学院吕志跃博士惠赠.方法:取BALB/c小鼠新鲜肝脏组织,提取总RNA,反转录合成cDNA.以合成的cDNA为模板,进行PCR扩增目的片段,将其和pEGFP-N1双酶切后连接构建pEGFP-上皮型钙粘蛋白,转染小鼠胚胎干细胞并进行体外分化.主要观察指标:RT-PCR及免疫细胞化学检测上皮型钙粘蛋白在分化系统中的动态表达,同时观察分化细胞间黏附能力的变化.结果:基因转染的胚胎干细胞分化后1-17 d稳定表达上皮型钙粘蛋白,而普通胚胎干细胞分化后上皮型钙粘蛋白的表达则逐渐降低.稳定表达上皮型钙粘蛋白的分化细胞间黏附能力明显增强,并在19 d时仍能保持致密的细胞连接和多层生长状态,普通胚胎干细胞则由拟胚体结构逐渐分化为松散的细胞群落.结论:稳定表达上皮型钙粘蛋白的胚胎干细胞分化后,细胞间黏附能力明显增强,并保持多层细胞生长状态.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡继业	暨南大学生命科学院	224	1517	16.0	24.0
2	黄冰	中山大学眼科中心	43	246	9.0	13.0
3	何晓顺	中山大学附属第一医院器官移植中心	181	840	13.0	19.0
4	胡安斌	中山大学附属第一医院器官移植中心	35	103	5.0	8.0