Notch1信号途径在食管鳞癌细胞中的激活及对细胞周期的影响

• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: Notchl信号途径 细胞周期 pcNICD栽体 EC9706细胞
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 908-913
• 页数: 6页
• 分类号: R735.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2009.11.003

摘要

目的 观察Notch1信号途径在食管鳞癌EC9706细胞中的激活状态及其对细胞周期的影响.方法 通过免疫细胞化学检测Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706细胞中的表达,并通过免疫荧光方法 研究Notch1基因在EC9706细胞中的激活状态.并且利用CCK-8试剂检测食管癌细胞的增殖状态.此外,采用RT-PCR和Western blot技术检测与细胞周期相关基因的表达,最后通过流式细胞仪进一步探索激活的Notch1信号途径对细胞周期的影响.结果 转染pcNICD后的食管鳞癌细胞株中发现Notch1基因的表达.免疫荧光结果显示,转染PCNICD后的食管鳞癌细胞株中Notch1信号途径处于激活状态.与未处理和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的生长速率明显受到抑制(P<0.01).此外,与未处理的和转染pcD-NA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的CDK2,cyclin D1和E基因的mRNA和蛋白的表达明显下调(P<0.05).转染pcNICD的EC9706细胞在G_0/G_1期的比率高达74.5%,而未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞在G_0／G_1期的比率分别为59.1％和59.0％.细胞周期分析显示瞬时表达NICE)的．DC9706细胞在G_0／G_1期比率的增加,提示激活的Notch1信号途径能够诱导细胞静止在G_0／G_1期.结论 Notch1信号途径的激活引起食管鳞癌细胞的细胞周期静止,提示Notch1 基因有可能成为治疗食管鳞癌的新靶点.