酪氨酸磷酸酶PRL-3单抗的制备及特性鉴定

• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 磷酸酶 PRL-3 单克隆 抗体
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 901-904
• 页数: 4页
• 分类号: R73-37
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2009.11.001

摘要

目的 制备并鉴定抗肝再生磷酸酶-3(Phosphatase of Regenerating Liver-3,PRL-3)单克隆抗体,为临床检测和以PRL-3为靶点的肿瘤治疗提供可能.方法 运用杂交瘤融合技术制备PRL-3单克隆抗体,通过Western blot检测和免疫沉淀鉴定其与原核及真核PRL-3蛋白的反应性;重组并诱导表达PRL-3的6个截短体,Western blot分析单抗结合的大致抗原表位.结果 共得到9株单抗,3株与PRL-1、PRL-2和PRL-3均反应,6株(9D8、9E2、9F4、11B2、4D3和4D10)只与PRL-3反应,其中4株特异性单抗可以与哺乳动物细胞表达的PRL-3反应;单抗9D8、9E2、9F4和11B2可以和PRL-3羧基末端(162-173位氨基酸)的短肽结合;4D3和4D10与中间部分(69～95位氨基酸)的短肽结合.结论 抗体9D8、9E2、9F4、11B2、4D3和4D10特异性强、亲和力高,为临床检测提供了可靠工具,并为进一步的功能研究奠定了基础.