基于序列分析的天蚕素A串连融合表达载体的构建

• 作者: 万祥辉 文阳安 杨细媚 涂植光
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 抗菌肽 CA 重叠PCR 串连表达 序列分析
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 76-79
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 2860字
• 语种: 中文

摘要

天蚕素A(Cecropin A,CA)是来源于惜古比天蚕(Hyalophoracecropia)的含有37个氨基酸的抗菌肽,在非极性环境中形成α螺旋型结构,具有抗菌活性强、抗菌谱广等特点.为降低天蚕素A对宿主的毒性及提高其表达丰度和稳定性,在序列分析的基础上设计了3条天蚕素A氨基酸序列,分别为CA19、CA36和CA210.根据大肠杆菌密码子的偏爱性分别合成相应的3对寡核苷酸链,并通过重叠PCR方法合成成熟肽CA.将含有CAl9、CA36、CA210和CA1～5个拷贝基因的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和BLR(DE3)PlysS,成功构建了串连融合表达载体,为下一步的抗菌活性及免疫表位的分析打下基础.