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VP_(22)修饰的CD基因工程化神经干细胞治疗大鼠C6脑胶质瘤体外实验研究
VP_(22)修饰的CD基因工程化神经干细胞治疗大鼠C6脑胶质瘤体外实验研究
作者:
刘福生
朱贵东
柴奇
苏伟
金贵善
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
慢病毒载体
VP_(22)穿梭蛋白
神经干细胞
C6胶质瘤细胞
摘要:
目的 探讨病毒蛋白VP_(22)在胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)基因工程化神经干细胞治疗大鼠C6胶质瘤中的作用.方法 质粒pAdTrack-CMV-CD中PCR获取CD片段,克隆到慢病毒(lentivirus)质粒pHIV-EGFP和pHIV-VP_(22)-EGFP载体上,获得重组质粒pHIV-CD-EGFP和pHIV-VP_(22)-CD-EGFP,采用酶切和PCR技术进行鉴定.病毒包装采用三质粒系统共同转染293T细胞.CD基因的表达采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法鉴定.Lentivirus-EGFP、lentivirus-CD-EGFP、lentivirus-VP_(22)-EGFP和lentivirus-VP_(22)-CD-EGFP四种慢病毒感染经体外原代培养、扩增的SD大鼠胎脑神经干细胞(Nerual stem cells,NSCs),体外与C6细胞按1:1比例共培养,并加入终浓度100 mg/L的5-氟胞嘧啶(5-FC)培养3 d后,MTT比色法测定细胞存活率.结果 酶切和PCR证实,重组的慢病毒中含有CD基因.慢病毒lentivirus-EGFP、lentivirus-CD-EGFP、lentivirus-VP_(22)-EGFP和lentivirus-VP_(22)-CD-EGFP分别感染NSCs后与C6细胞共培养,在5-FC作用下,其细胞存活率分别为(95.57±4.83)%,(49.96±7.19)%,(94.25±4.32)%和(28.06±6.26)%.统计学处理,转染lentivirus-CD-EGFP和lentivirus-VP_(22)-CD-EGFP组的细胞存活率明显低于其相应对照组lentivirus-EGFP和lentivirus-VP_(22)-EGFP(P<0.01);其中转染lentivirus-VP_(22)-EGFP组的细胞存活率又明显低于lentivirus-EGFP组(P<0.01).结论 VP_(22)能够在体外增强CD基因修饰的NSCs抗C6胶质瘤疗效.
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文献信息
篇名
VP_(22)修饰的CD基因工程化神经干细胞治疗大鼠C6脑胶质瘤体外实验研究
来源期刊
中华神经外科杂志
学科
医学
关键词
慢病毒载体
VP_(22)穿梭蛋白
神经干细胞
C6胶质瘤细胞
年,卷(期)
2009,(11)
所属期刊栏目
基础论著
研究方向
页码范围
1039-1043
页数
5页
分类号
R74
字数
4600字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.1001-2346.2009.011.031
五维指标
传播情况
被引次数趋势
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(/年)
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引文网络
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(4)
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研究主题发展历程
节点文献
慢病毒载体
VP_(22)穿梭蛋白
神经干细胞
C6胶质瘤细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中华神经外科杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1001-2346
CN:
11-2050/R
开本:
大16开
出版地:
北京市丰台区南四环西路119号B区1号楼10层1001
邮发代号:
18-56
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
7686
总下载数(次)
12
总被引数(次)
66548
相关基金
北京市自然科学基金
英文译名:
Natural Science Foundation of Beijing Province
官方网址:
http://210.76.125.39/zrjjh/zrjj/
项目类型:
重大项目
学科类型:
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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