芒果AFLP分子标记体系的建立

• 作者: 王园 金志强 陈业渊 雷新涛
• 来源期刊: 农业科学与技术（英文版）
• 学科: 农学
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 72-75
• 页数: 4页
• 分类号: S6
• 字数: 1908字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4229-B.2009.05.017

摘要

[目的]构建我国芒果主要栽培品种的AFLP分子标记体系.[方法]供试31个芒果品种为:Banganapalli、台农1号、桂热10号、Carabao、Nang Klang Wun、泰国506、紫花、Keitt、粤西1号、斯里兰卡811、龙井大芒、红象牙、小菲、泰国504、Spooner、R2E2、串芒、鹦鹉芒、Irwin、金煌、Kent、海豹、Haden、Dashehari、Neelum、桂香、Ono、白象牙、Bambaroo、Macheso、Zill.以粤西1号芒果幼嫩叶片为材料探索提取高质量DNA的方法,为了获得更高质量和数量的基因组DNA,对曾杰的方法进行了下列改良:A、用2%的CTAB提取液,其他不变;B、用3%的CTAB提取液,但在提取后只用氯仿异戊醇提取2次;C、用3%的CTAB提取液,但在提取后用氯仿异戊醇提取1次;D、用3%的CTAB提取液,但在提取后用酚氯仿异戊醇提取1次.用供试品种中的台农1号、Carabao、Keitt、Kent对64对引物组合进行筛选,其中8个EcoR I引物分别是E-AAC、E-AAG、E-ACA、E-ACT、E-ACC、E-ACG、E-AGC、E-AGG,8个Mse I引物分别是M-CAA、M-CAC、M-CAG、M-CAT、M-CTA、M-CTC、M-CTG、M-CTT.利用AFLP分子标记在DNA水平上对芒果进行遗传多样性研究.[结果]4种方法提取的DNA较完整,均可得到明亮清晰的主带.且综合比较,用B方法(即采用较高浓度的提取液,提取后用氯仿异戊醇提取2次)可获得高质量、高纯度DNA,可用于芒果AFLP标记分析.供试64对引物组合中适用于芒果种质资源AFLP分析的引物组合共14对,分别是E-ACC/M-CAC、E-AAC/M-CAT、E-AAG/M-CAC、E-AAG/M-CAT、E-ACA/M-CAC、E-ACA/M-CAG、E-ACA/M-CAT、E-ACA/M-CTA、E-ACT/M-CAC、E-ACC/M-CTC、E-ACC/M-CTG、E-AGC/M-CAG、E-AGC/M-CTA、E-AGC/M-CTC.这14对引物组合在31份芒果种质中共扩增出1 761 条带, 其中多样性带比例为97%.平均每对引物产生125.8 条带和121.6 条多样性带.14对引物均可将上述31个品种完全区别开来,其中E-ACA/M-CAT和E-AGC/M-CTC引物组合多态性最大,达100%,可用于芒果品种指纹图谱构建.[结论]利用AFLP可以高效检测芒果种质资源分子标记多样性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷新涛	中国热带农业科学院南亚热带作物研究所	55	498	12.0	20.0
2	金志强	中国热带农业科学院生物技术研究所	98	894	17.0	25.0
3	陈业渊	中国热带农业科学院品种资源研究所	125	1269	19.0	29.0
4	王园	中国热带农业科学院生物技术研究所	3	21	2.0	3.0