小分子干扰核糖核酸转染小鼠成骨细胞的效率研究

• 作者: 付强 吴昌敬 张艺平 徐亚娟 李友瑞 沈韵
• 来源期刊: 广东牙病防治
• 学科: 生物学
• 关键词: siRNA 转染 成骨细胞 质粒 脂质体
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 基础与应用研究
• 页码范围: 406-410
• 页数: 5页
• 分类号: Q75
• 语种: 中文

摘要

目的 研究直接转染化学合成小分子干扰核糖核酸(small interfering ribonucleic acid,siRNA)和通过质粒转导后在细胞内合成siRNA两种方法转染小鼠成骨细胞的转染效率,并优化实验条件.方法 从无特定病原体(specefic pathogen free,SPF)级BALB/c新生鼠取材进行成骨细胞原代培养,经碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和矿化结节检测鉴定为成骨细胞后传代至第3代,接种至24孔培养板.使用化学合成的经羧基荧光素标记的siRNA 和带绿色荧光蛋白基因的质粒分别转染小鼠成骨细胞,在实验中改变siRNA和脂质体的用量,并改变转染时的细胞密度,通过荧光显微镜检测转染效率.同时,使用四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的转染试剂的细胞毒性.结果 使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞获得了较高的转染效率,其最大值达到90%以上,与质粒的转染效率相比有很大提高,且其细胞毒性在可接受的范围内.结论 使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞可以获得较高的转染效率,是一种理想的实验方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴昌敬	广州市中西医结合医院口腔科	13	66	4.0	7.0
2	沈韵		1	1	1.0	1.0