亲和层析法分离纯化蒜氨酸酶

• 作者: 吴熙然 张相年 胡红华 赵树进
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 蒜氨酸酶 分离纯化 亲和层析 S烷基-L-半胱氨基
• 年，卷（期）: 2009,（19）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 244-247
• 页数: 4页
• 分类号: TS201.2
• 字数: 3559字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2009.19.056

摘要

目的:以蒜氨酸酶竞争性抑制剂S-烷基-L-半胱氨酸为配基,制备亲和层析胶分离纯化蒜氨酸酶.方法:以1,4-丁二醇二缩水甘油醚为活化剂,在碱性条件下,活化载体Sepharose CL-4B,偶联半胱氨酸,作为蒜氨酸酶的亲和层析胶.低温粉碎大蒜所得的大蒜液,经25%PEG-5000沉淀,得到粗酶.用制得的亲和胶分离纯化,并利用SDS-PAGE对酶纯度进行检验.结果:大蒜液用25%PEG-5000沉淀可以较简便地分离出粗酶,经制得的亲和胶层析,活力回收达到68.42%,比活力为9.493U/mg,纯化倍数达到22.17倍.提纯的蒜氨酸酶为电泳纯,亚基约为52kD.纯酶的最适温度为35℃,最适pH值为6.23,Km=9.845mmol/L,Vmax=24.93 U/mg.结论:以S-烷基-L-半胱氨酸为配基制得了,适合于蒜氨酸酶分离纯化的亲和载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵树进		271	2349	23.0	37.0
2	张相年		35	258	8.0	14.0
3	吴熙然	华南理工大学生物科学与工程学院	3	15	2.0	3.0
7	胡红华	华南理工大学生物科学与工程学院	3	15	2.0	3.0