猪白细胞介素2基因的克隆及腺病毒表达载体的构建

• 作者: 何津佳 刘忠华 周庆丰 周美华 毕英佐 苏润环 龚朋飞
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪白细胞介素2 基因克隆 腺病毒载体 基因表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 分类号: Q785|S858.28
• 字数: 4007字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2009.01.005

摘要

根据GenBank中收录的猪白细胞介素2(pIL-2)基因序列,设计1对特异性引物.运用RT-PCR技术从刀豆素(Con A)诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到pIL-2基因,并将其克隆至pGEM-T Easy栽体上.核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长493 bp,含465 bp的开放阅读框,编码154个氨基酸,与已知pIL-2核苷酸序列和氨基酸序列的同源性都高达100%.将克隆的pIL-2基因编码阅读框亚克隆至腺病毒穿梭栽体pShuttle-CMV,电转化含腺病毒基因组(pAdEasy-1)的大肠埃希茵细胞BJ5183-AD-1,成功获得了重组腺病毒DNA,将纯化后的重组腺病毒DNA转染AD-293细胞,经过病毒基因组的PCR鉴定和转录水平的RT-PCR鉴定,初步表明,获得了表达pIL-2的重组腺病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕英佐	华南农业大学动物科学学院	216	2631	28.0	41.0